Ágar Chromocult Coliform ES Seletividade Aumentada Merck 500g Ágar Chromocult Coliform ES Seletividade Aumentada Merck 500g

Informações do Produto

Código: 49451

CHROMOCULT COLIFORM AGAR ES (SELETIVIDADE AUMENTADA) MERCK
APROVADO PELA AOAC LICENÇA N° 041002
RENDIMENTO 34,5g/L
Embalagem 500g.

Composição Típica (g/litro)
Peptona 5.0; cloreto de potássio 7,5; MOPS 10.0; sais biliares 1,15; propionato 0,5; Ágar-Ágar 10,0; 6-Cloro-3-
indoxil-beta-Dgalactopiranósido 0,15; isopropil-beta-D-tiogalactopiranósido 0,1; 5-bromo-4-cloro-3-indoxil-
ácido beta-D-glucurônico 0,1.

Preparação
Suspenda 34,5 g em 1000 ml de água purificada e aqueça até ferver, agitando frequentemente, até completa dissolução (aproximadamente 45 minutos).

Não autoclave, não superaqueça.

Resfrie imediatamente o meio em banho-maria a 45-50 °C (um precipitado se forma se o período de 2 horas for excedido).

pH: 7,0 ± 0,2 a 25 °C
O meio é límpido e incolor.

Preparação da Amostra
Prepare as amostras de teste utilizando técnicas laboratoriais padrão, como as descritas no Manual Analítico Bacteriológico ou na norma ISO específica para o produto em questão.

Para minimizar a possível interferência entre a coloração de coliformes/E. coli e a amostra (por exemplo, pH baixo), é
recomendado diluir a amostra 1:10 em uma solução tamponada (por exemplo, adicionar 450 ml de tampão fosfato de Butterfield, água peptonada tamponada ou caldo peptonado de cloreto de sódio tamponado a um liquidificador contendo 50 g de amostra e bater por 2 minutos) e, em seguida, realizar diluições adicionais conforme necessário.

Aplicação
O Chromocult® Coliform Agar ES é geralmente inoculado pelo método de semeadura em placa.

Usando uma pipeta estéril, transfira 1 ml da amostra líquida (ou 1 ml da diluição apropriada) para uma placa de Petri estéril.
Despeje em cada placa de Petri aproximadamente 15 ml do Chromocult® Coliform Agar enquanto o meio ainda estiver líquido,
mas somente após o meio ter sido resfriado a 45-50°C em banho-maria. Agite cuidadosamente a placa até que o inóculo esteja completamente misturado com o meio. Deixe a mistura solidificar em uma superfície horizontal fria.
Incube as placas inoculadas aerobicamente a 35-37°C em posição invertida (lado do ágar para cima) por 24 horas.
Após a incubação, examine as placas para verificar a presença de colônias típicas de E. coli e outros coliformes.

Resultados
Conte as colônias azul-escuras a violetas como E. coli e as colônias salmão a vermelhas como outros coliformes.

O total de todas as colônias vermelhas e azuis é a contagem total de coliformes.
Algumas E. coli (3-4%) são β-glucuronidase-negativas e crescem como colônias vermelho-salmão, por exemplo, cepas de E. coli O157.

A flora acompanhante aparece como colônias incolores, exceto para alguns organismos que possuem atividade de β-D-glucuronidase.
Essas colônias apresentam coloração azul-clara a turquesa.

A contagem total de coliformes não deve exceder 150 UFC típicas e 300 UFC totais (coliformes totais e bactérias acompanhantes) por placa. Acima desses níveis, as colônias não podem ser contadas com precisão. Amostras que apresentem contagem superior a esses níveis máximos devem ser diluídas antes da inoculação.

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